減少化學(xué)污染

對(duì)于自己用粉末配制培養(yǎng)液的實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，配制培養(yǎng)液要使用重蒸餾水，以減少帶入化學(xué)污染的機(jī)會(huì)。如果要添加NaHCO3，要選用純度高的NaHCO3，**好是經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試的。

另外盡量使用一次性的細(xì)胞培養(yǎng)器皿。由于標(biāo)準(zhǔn)廠家一次性細(xì)胞培養(yǎng)器皿的生產(chǎn)環(huán)境比較嚴(yán)格，得到的產(chǎn)品潔凈度很高，從而減少了由細(xì)胞培養(yǎng)器皿帶入污染的機(jī)會(huì)。

減少生物污染

由于一般的污染發(fā)生在細(xì)胞培養(yǎng)的操作過(guò)程中，所以良好的細(xì)胞培養(yǎng)操作環(huán)境和操作習(xí)慣是減少生物污染的關(guān)鍵。

要用一個(gè)專門的房間用于細(xì)胞培養(yǎng)，注意保持房間的清潔。

要有一個(gè)定期檢驗(yàn)的合格的超凈臺(tái)（超凈臺(tái)內(nèi)的潔凈度應(yīng)該為100級(jí)，與計(jì)算機(jī)硬盤的生產(chǎn)環(huán)境相當(dāng)）。在使用超凈臺(tái)前開(kāi)啟通風(fēng)裝置并打開(kāi)紫外燈滅菌30分鐘。操作時(shí)要戴一次性橡膠手套，并噴灑70%酒精消毒。任何帶入超凈臺(tái)的非無(wú)菌物件都要噴灑70%酒精消毒。收集廢培養(yǎng)液的瓶子要加入漂白粉或漂白液，以避免微生物的生長(zhǎng)。每次實(shí)驗(yàn)完后，要向通向廢培養(yǎng)液瓶的塑料管內(nèi)噴灑70%酒精，并且用蒸餾水和70%酒精先后擦拭臺(tái)面（只用70%酒精擦拭會(huì)導(dǎo)致灑落在臺(tái)面的培養(yǎng)液在臺(tái)面上形成難以清除的污垢）。

不要在超凈臺(tái)里使用酒精燈等燈具，因?yàn)檫@樣會(huì)因燈的熱的火焰引起的空氣對(duì)流而破壞超凈臺(tái)里本來(lái)規(guī)則的空氣層流，使本來(lái)存在于超凈臺(tái)底層的微粒被帶到上層，帶來(lái)更多的污染機(jī)會(huì)。

加熱培養(yǎng)液的37°C恒溫水浴中非常容易有微生物的生長(zhǎng)，從而成為一個(gè)重要的污染源。所以需要定期清洗恒溫水浴。 細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)的用于保持濕度的水盤也需要定期清洗。為了減少不同細(xì)胞株間的相互污染，不要用同一瓶培養(yǎng)液或胰酶培養(yǎng)不同的細(xì)胞；不要在一個(gè)超凈臺(tái)上同時(shí)進(jìn)行多種細(xì)胞的操作。分裝每次小量使用的溶液（如胰酶、抗生素、谷氨酸溶液），以減少多次使用時(shí)污染的機(jī)會(huì)。

以防萬(wàn)一

即使再小心，污染難免還是會(huì)發(fā)生。所以得到一個(gè)新的細(xì)胞株后的**件事情，是把細(xì)胞生長(zhǎng)擴(kuò)增后凍存起來(lái)，以備不測(cè)。